二十多年来，1型发作性睡病的诊断一直依赖于单一的实验室检测指标：通过放射免疫分析法测定脑脊液中神经肽下丘脑分泌素-1（食欲素-A）的浓度。低于110 pg/mL被视为诊断标准。但该检测方法本身长期以来一直是隐忧之源。放射免疫分析并不直接测量食欲素-A，而是测量抗体结合，后者可能受到交叉反应性、肽段碎片以及试剂盒批间差异的影响。北京大学人民医院及北大-IDG/麦戈文脑科学研究所的薛培军和韩芳在7月12日在线发表于《睡眠》（Sleep）期刊的一篇综述中提出，该领域已准备好迈入新阶段。
这篇题为”从放射免疫分析到质谱法：重新定义发作性睡病中下丘脑分泌素/食欲素的测量”的文章，恰逢这一转变已在推进之际。过去十年来，一系列研究比较了放射免疫分析结果与液相色谱-串联质谱法所得结果，差异令人震惊。
比较研究的发现
2016年，Hirtz及其同事在《科学报告》（Scientific Reports）上发表了首个食欲素-A定量质谱检测法，证明液相色谱-串联质谱法能以高特异性和宽动态范围测量该肽。五年后，Lindström等人在《临床生物化学》（Clinical Biochemistry）上报告称，商业放射免疫分析试剂盒测得的食欲素-A浓度平均比液相色谱-串联质谱法高出五倍，这一差异足以在诊断临界值附近改变临床分类。
最新且可能最具揭示意义的数据来自Maus等人，该研究于今年早些时候发表在《睡眠医学》（Sleep Medicine）上。研究人员使用液相色谱-串联质谱法分析了80名转诊进行临床食欲素检测患者的免疫纯化脑脊液样本，发现全长食欲素-A（一种33个氨基酸的肽）在脑脊液中完全检测不到。相反，两种稳定的N端片段，食欲素-A<sub>1–14</sub>和食欲素-A<sub>1–16</sub>，是主要存在形式。当将这些片段的液相色谱-质谱定量结果与临床放射免疫分析结果进行比较时，相关性很强（Spearman’s ρ = 0.91至0.94），两种方法在诊断分类（是否存在食欲素缺乏）上的一致率为88%。
这一发现解开了一个长期存在的谜团：放射免疫分析一直能够检测到食欲素-A免疫反应性，但它实际结合的是一组肽段，而非全长激素。质谱法通过鉴定被测量的确切分子种类，使情况变得清晰。
为何重要
从放射免疫分析到质谱法的转变，其意义超越分析化学本身。一方面，液相色谱-串联质谱法为实现标准化提供了途径。放射免疫分析试剂盒因制造商和批号不同而异，使得跨中心或跨时间比较结果变得困难。而基于质谱法的检测，通过合成肽标准品进行校准，可以以高得多的 fidelity 进行重现。
可及性也是一个问题。目前食欲素-A的放射免疫分析仅在全世界少数专业实验室进行。质谱平台在临床生化科室中日益普及，这提高了食欲素检测更广泛可及的可能性，从而缩短许多发作性睡病患者当前面临的诊断漫途。
薛培军和韩芳领导着中国主要的睡眠医学中心之一，他们将这一转变描述为不可避免。他们指出，累积的证据支持采用液相色谱-串联质谱法作为脑脊液食欲素定量的新参考方法，同时需要理解诊断临界值将需要针对新技术重新确立。
局限性
该综述本身并未提供新的实验数据。基于质谱法的检测诊断临界值尚未经过前瞻性多中心研究的正式验证，而片段浓度与临床结局之间的关联，超出食欲素缺乏的二分法分类，仍有待确立。
结论
北京大学的一篇方法学综述指出，质谱法已准备好取代放射免疫分析，成为发作性睡病诊断中测量脑脊液食欲素-A的标准方法。这一已得到日益增多的比较数据支持的转变，有望带来更高的准确性、可重复性以及更广泛的检测可及性。
婷 翻译
Source: Xue P, Han F. From radioimmunoassay to mass spectrometry: redefining hypocretin/orexin measurement in narcolepsy. Sleep. 2026 Jul 12:zsag190. doi: 10.1093/sleep/zsag190. PMID: 42436637.